SAMPLE PREPARATION

高分子SAXSプロファイルの決定には、少なくとも2回の実験測定が必要である。 1つの測定は、「緩衝液ブランク」、すなわち巨大分子を含まない溶媒のみを含むサンプル（図A）です。もう1つの測定は「試料」で、巨大分子と溶媒の両方を含んでいます（図B）。

従って、巨大分子による実際のSAXSプロファイルは、「試料」に起因する散乱から「緩衝液ブランク」による散乱を差し引くことによって差分曲線として決定される。

図 A：バッファー	図 B：試料および緩衝液	図C：SAXSプロファイル

試料と緩衝液との間の差の強度は、1）粒子濃度または2）溶媒の平均電子密度のいずれかを変えることによって調整することができる。溶媒の電子密度は、スクロース、グリセロールまたは塩を緩衝液に加えることによって変えることができる。

適切な緩衝液ブランクを生成するには、次のいずれかの方法を推奨する。

1.平衡透析：適切な緩衝液に対する試料の透析により、平衡緩衝液を「ブランク」として確保する。

2.バッファ交換：Amicon Ultra、Vivaspinなどのスピンフィルタデバイスを使用。サンプルを塗布する前に、まずバッファーでデバイスを洗浄するのが最善である。

3.ゲル濾過クロマトグラフィー：この分離はサンプルを効果的にランニングバッファーに交換する。

シンクロトロンX線源でのSAXSデータ収集およびサンプル調製の詳細については、ALSのBL12.3.1へのこのリンクを参照。 (http://bl1231.als.lbl.gov/saxs_protocols/saxs_sample_prep.php)